Comparación de la actividad in-vitro de dos presentaciones de linezolid frente a cepas de Staphylococcus aureus

Albeiro Manuel Marrugo Padilla; Antistio Aníbal Álvis Amador; Julián Javier Martínez Zambrano; Erlin Antonio Guevara Fonseca; Heider Armando Morales Manjarrez

Comparación de la actividad in-vitro de dos presentaciones de linezolid frente a cepas de Staphylococcus aureus

ARTÍCULO ORIGINAL

Comparación de la actividad in-vitro de dos presentaciones de linezolid frente a cepas de Staphylococcus aureus

Comparison of the in vitro activity of two linezolid forms against Staphylococcus aureus strains

Albeiro Manuel Marrugo Padilla, Antistio Aníbal Álvis Amador, Julián Javier Martínez Zambrano, Erlin Antonio Guevara Fonseca, Heider Armando Morales Manjarrez

Universidad de Cartagena, República de Colombia.

RESUMEN

Introducción: el linezolid es una oxazolidinona empleada en el tratamiento de infecciones causadas por bacterias aeróbicas grampositivas, su mecanismo de acción consiste en la inhibición de la síntesis de proteínas bacterianas, al interaccionar con nucleótidos ubicados en el sitio A de la subunidad ribosomal de 50S. En Colombia se comercializa un genérico del medicamento, como política sanitaria que busca promover el acceso de medicamentos a toda la población.
Objetivo. comparar la actividad in vitro de tres lotes de linezolid de marca (Zyvoxid) y genéricos, frente a tres cepas de Staphylococcus aureus, dos de ellas aisladas de pacientes internos con desbridamiento de piel, y heridas abiertas en cuello y muslo de la E.S.E Hospital Universitario del Caribe, y una cepa de referencia.
Métodos: fueron seleccionados tres lotes Zyvoxid y de linezolid genérico, junto con tres cepas de S. aureus, a las cuales se les aplicaron pruebas confirmatorias y de crecimiento bacteriano, a su vez se determinaron las concentraciones mínimas inhibitorias de los antibióticos evaluados frente a las cepas, empleando el método de microdilución en caldo.
Resultados: los lotes evaluados de Zyvoxid y los de linezolid genéricos presentaron igual eficacia, arrojando valores de CMI entre 1-2 𝞵g/mL en cada uno de los ensayos realizados, las marcas no presentaron diferencias estadísticas significativas.
Conclusiones: se demostró que no existen diferencias significativas en cuanto a la inhibición de las cepas de Staphylococcus aureus evaluadas frente a las alternativas de linezolid.

Palabras clave: linezolid; medicamento de marca; medicamento genérico.

ABSTRACT

Introduction: linezolid is an oxazolidinone used in the treatment of infections caused by gram-positive aerobic bacteria; their mechanism of action is based on inhibition of bacterial protein synthesis by interacting with nucleotides located in the A site of the 50S ribosomal subunit. In Colombia, a generic drug is marketed as part of the health policy that seeks to promote the access of medicines to the entire population.
Objetive: comparing the in vitro activity of three batches brand linezolid (Zyvox) and generic, against three strains of Staphylococcus aureus, two of them isolated from inpatients with debridement of skin and open wounds on the neck and thigh that Hospital Universitario de Caribe Hospital, and a reference strain.
Methods: three batches were selected from Zyvoxid and generic liezolid, together with three strains of S. aureus, which were applied confirmatory tests and bacterial growth, at the same time were determined the minimum inhibitory concentrations of the antibiotics evaluated against strains, using the broth microdilution method.
Results: batches evaluated from Zyvox and generic linezolid presented as effectively throwing MIC values of 1-2 𝞵g / mL in each of the trials, the marks did not show statistically significant differences.
Conclusions: showed no significant differences in inhibition of Staphylococcus aureus strains evaluated alternatives linezolid.

Key words: linezolid; brand drug; generic drug.

INTRODUCCIÓN

El linezolid es un agente antimicrobiano con utilidad clínica en el tratamiento de infecciones causadas por bacterias aeróbicas grampositivas, aunque también posee actividad in-vitro contra ciertas anaerobias y gramnegativas (cuadro), fue el primer miembro de la familia de las denominadas oxazolidinonas, desarrolladas en 1987 por parte de los laboratorios. Surgieron como una nueva alternativa en el tratamiento infeccioso de tipo bacteriano, presenta un mecanismo de acción distinto a los conocidos previamente,¹ basado en la inhibición de la síntesis proteica bacteriana, mediante la unión del fármaco a la subunidad ribosomal mayor de 50S, cerca del centro catalítico ubicado en el sitio A, específicamente interactuando por puentes de hidrogeno con los nucleótidos, Guanina 2540, Uracilo 2539 y Citosina 2487, ubicados en el RNAr 23S, que conforma el centro de transferencia de aminoácidos, lugar donde se lleva a cabo la formación del enlace peptídico; la ubicación del fármaco en dicho sitio genera competencia con el ARNt entrante, e impide el ensamble del complejo de iniciación funcional bacteriano de 70S, un componente esencial del proceso de traducción del ARN ^2-4(figura 1).

La estructura tricíclica del linezolid le confiere ciertas propiedades farmacocinéticas y farmacodinámicas, como es su adecuada absorción oral, la cual en muchos casos puede llegar a ser del 100 %, un tiempo de vida media aproximado de 5 h, unión a proteínas plasmáticas del 31 %, volumen de distribución de 0,6 a 0,7 L/kg,⁴ metabolismo en un 60 % por vía hepática, 30 % por vía renal y del 10 % por heces,⁵ escasa probabilidad de generar resistencia cruzada con agentes β-lactámicos, vancomicina y fármacos novedosos como la quinupristina, dalfopristina y la daptomocina.¹⁰ La presencia de un anillo fluorado y grupos piperacínicos potencian su actividad farmacológica, al promover la interacción y unión con la subunidad ribosomal bacteriana, y su grupo morfolínico le aumenta la solubilidad y el perfil farmacocinético,⁵ permitiéndole llegar a tejidos profundos y penetrar adecuadamente en hueso, piel, pulmones y líquido cefalorraquídeo¹¹(figura 2).

El linezolid se introdujo en la práctica clínica en el año 2000,¹² toma auge como principal agente terapéutico de uso parenteral y oral en pacientes con infecciones de piel, tejidos blandos, y neumonía^13,14causadas por Sthaphylococcus aureus multirresistentes (SAMR), debido al elevado fallo terapéutico asociado al uso de vancomicina como agente terapéutico. Presenta una baja penetración tisular en pulmón y elevada concentración mínimas inhibitorias (CMIs) frente a SAMR y demás patógenos.¹⁵ Los regímenes de dosificación del linezolid empleados en clínica oscilan entre los 600 mg/12 h, excepto en las infecciones cutáneas en las que se administran solo 400 mg/12 h, a su vez se administran dosis pediátricas de 10 mg/Kg cada 8 o 12 h.^5,16

La actividad y el espectro de acción del linezolid se monitorea continuamente por medio de programas de vigilancia internacionales, iniciados varios años antes del lanzamiento del producto por Zyvox® Antimicrobial Potency Study (ZAPS), desarrollados como una estrategia para la identificación temprana de posibles resistencias bacterianas al fármaco^17,18y la determinación de las CMIs frente a diversos patógenos, soportado por pruebas internacionales de referencia, dentro de la que se encuentra la microdilución en caldo, siguiendo métodos del Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) y criterios interpretativos de CMI por CLSI y European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing (EUCAST).

Con el transcurso de los años y al vencimiento de su patente, las industrias farmacéuticas empezaron a producir alternativas genéricas de linezolid, junto con la síntesis de nuevos agentes del grupo de las oxazolidinonas, como el tedizolid y radezolid,¹⁹ promoviendo la apertura y mayor disponibilidad de marcas genéricas y comerciales de uso clínico, acto que agudizó la actividad de selección de un medicamento adecuado frente el arsenal terapéutico ofertado.²⁰

Un medicamento genérico, es aquel que contiene un principio activo ya conocido, previamente desarrollado, y que por ende tendrá un costo menor que el de su contrapartida innovadora, al no tener que mostrar para su comercialización el desarrollo de ensayos clínicos que demuestren su eficacia y seguridad, dado que ya se han establecido por el innovador y su uso continuado en la práctica clínica, solo tienen que poseer equivalencia farmacéutica, y posibles diferencias en los excipientes y en la tecnología farmacéutica empleada en el proceso de manufactura, en contraste con el medicamento innovador;²¹ el desarrollo de alternativas genéricas surge como uno de los mecanismos estatales capaces de reducir el gasto farmacéutico, y promover el uso de los medicamentos por toda la población, sin importar su condición económica.

En el caso particular de Colombia, la adquisición de medicamentos innovadores por parte de la población de bajos recursos se torna en un problema de tipo económico, para el prestador de salud y el paciente, debido a los costos elevados de los mismos, lo que hace necesaria la prescripción de genéricos, en aras de hacer asequible la terapia farmacológica; sin embrago, en la actualidad existe un debate universal sobre la intercambiabilidad de medicamentos innovadores por sus homólogos genéricos, soportado en la génesis de dudas entre los usuarios y prestadores de los servicios de la salud, en torno a la calidad y confiabilidad de estos últimos frente a su contrapartida, generando concepciones en torno a la calidad del producto guiado por su bajo costo, es por esto que se hace necesario el desarrollo de estudios que brinden evidencias en la resolución de dudas sobre la calidad de las alternativas genéricas, que permitan hacer críticas del desempeño de estos, respecto a sus equivalentes. En consideración a lo expuesto y que en la actualidad el linezolid presenta un solo medicamento genérico comercializado en Colombia, el objetivo del presente trabajo fue comparar la actividad in vitro de tres lotes de linezolid de marca (Zyvoxid) con tres lotes genéricos, frente a tres cepas de Staphylococcus aureus (S. aureus), una de referencia ( Staphylococcus aureus ATCC29223) y dos cepas aisladas de pacientes internos con desbridamiento de piel, y heridas abiertas en cuello y muslo de la E.S.E. Hospital Universitario del Caribe (HUC) del distrito Cartagena de Indias, basados en la determinación de las CMIs de los antibióticos seleccionados.

MÉTODOS

Se realizó un estudio experimental de actividad farmacológica in vitro, de tipo prospectivo y analítico.

SELECCIÓN DE LOS LOTES DE ANTIBIÓTICOS Y CEPAS DE Staphyloccocus aureus.

Los lotes evaluados fueron seleccionados de manera aleatoria en diferentes droguerías del distrito de Cartagena de Indias Colombia, en presentación farmacéutica de bolsas para infusión de 500 mL, con una concentración de linezolid de 2 mg/mL, a su vez se empleó un estándar secundario de linezolid como patrón de control en el estudio, para contar finalmente con siete muestras de antibióticos (tres de Zyvoxid, tres genéricas y el estándar secundario tipo USP), de igual forma, se seleccionaron tres cepas de S. aureus, una de referencia (Staphyloccocus aureus ATCC 29223) y dos cepas aisladas a partir de muestras clínicas de pacientes con desbridamiento de piel, y heridas abiertas en cuello y muslo del HUC.

APLICACIÓN DE PRUEBAS CONFIRMATIVAS PARA Sthaphylococcus aureus EN LAS CEPAS DE TRABAJO.

La confirmación de las cepas fue realizada con base en ensayos de identificación de S. aureus, las cuales incluyen pruebas bioquímicas y de crecimiento en cultivos selectivos y diferenciales,²² además de la tinción de rutina de Gram, para posterior observación al microscopio óptico. Las cepas evaluadas se sometieron a la prueba de catalasa, la cual consiste en añadir una gota de peróxido de hidrogeno al 3 % sobre cada cepa depositada previamente en un porta objeto, en cuanto a la prueba de coagulasa, se agregó en un tubo de ensayo 250 µL de plasma humano anticoagulado con EDTA, junto con una asada por cada cepa, incubándolas durante cuatro horas a 37 °C; concluido el tiempo de incubación las cepas fueron sembradas en agar manitol salado (AMS), el cual es selectivo y diferencial para Staphylococcus.²³

EVALUACIÓN DE LA PUREZA DE LAS CEPAS.

Para garantizar la pureza del inóculo fueron escogidas tres colonias por cada cepa cultivada en AMS, con las cuales se preparó una suspensión en Caldo Mueller-Hinton (CMH), tomando una alícuota de la suspensión de cada cepa y se cultivándo en Agar Mueller-Hinton (AMH) por 24 horas a 37 ºC, una vez transcurrido el periodo de incubación se realizó tinción de Gram para verificar la ausencia de contaminación.²⁴

CONSTRUCCIÓN DE LAS CURVAS DE CRECIMIENTO BACTERIANO.

De los cultivos en AMH fueron escogidas tres colonias por cada cepa de S. aureus, las cuales se suspendieron de manera separada en CMH por 4 horas, hasta alcanzar una turbidez de 0,5 en la escala de Mc Farland, a continuación fueron diluidas 100 veces con posterior incubación a 35±2 °C por un periodo de 24 horas. De manera análoga se tomaron muestras a tiempo cero y al transcurrir cada hora de incubación, con el fin de medir la densidad óptica de las suspensiones por espectrofotometría de absorción molecular UV-Vis, empleando un lector de microplacas Multiskan EX, Thermo Scientific, a una longitud de onda de 620 nm, cada lectura se realizó por cuadruplicado tomando como control de esterilidad el CMH, las absorbancias obtenidas fueron graficadas contra el tiempo en horas.²⁵

DETERMINACIÓN DE LA CMI DE LOS LOTES DE ANTIBIÓTICOS FRENTE A LAS CEPAS DE S. aureus.

La determinación de la CMI realizó de acuerdo a lo descrito por el método de microdilución en caldo, descrito por CLSI 2009, inicialmente se preparó el inoculo de cada cepa de trabajo, partiendo de los cultivos en AMH resultantes de la evaluación de la pureza de las cepas, de estos se escogieron colonias aisladas, las cuales fueron transferidas a tubos con CMH incubados a 37 °C por 24 horas, una vez concluida la incubación fueron cultivadas en AMH, de estos cultivos se seleccionaron tres colonias por cada cepa, transfiriéndolas posteriormente a tubos de ensayo con 5 mL de CMH, las suspensiones obtenidas se incubaron a 37 °C por 4 horas; la concentración bacteriana del caldo se llevó hasta 10⁸UFC/mL aproximadamente, ajustándolas con CMH estéril hasta obtener una valor de turbidez equivalente al estándar 0,5 de Mc Farland, fueron tomados 100 µL de cada suspensión para ser diluidos con 9,9 mL de CMH estéril, y así obtener finalmente una concentración de 10⁶UFC/mL.²⁴ Una vez preparado el inóculo de cada cepa, se diluyeron las muestras de cada lote de antibiótico genérico, de Zyvoxid y del estándar, a partir de una solución de 2 000 µg/mL de linezolid, para cada presentación; de estas soluciones fueron tomados 96 µL, los cuales se diluyeron en un tubo de ensayo hasta un volumen final de 1,5 mL con agua estéril, obteniendo una concentración de 128 µg/mL de linezolid, a partir de esta solución se tomaron 750 µL y se diluyeron en un tubo de ensayo hasta 1,5 mL con agua estéril, este último procedimiento se realizó nueve veces de manera seriada, obteniendo así once soluciones de trabajo con concentraciones de 128; 64; 32; 16, 8; 4; 2; 1; 0,5; 0,25, 0,125 µg/mL de linezolid respectivamente.

Fueron mezclados 50 µL de la dilución de cada antibiótico, con 50 µL del inóculo de cada cepa de trabajo, en pozos de microplaca de poliestireno, obteniendo así en cada pozo una concentración estándar de cada cepa de 5X10⁵UFC/mL, y una concentración creciente de cada antibiótico de 64; 32; 16; 8; 4; 2, 1; 0,5; 0,25; 0,125 y 0,0625) µg/mL de linezolid respectivamente,²⁴ en el ensayo se usó como control positivo de crecimiento inóculo bacteriano-solución salina al 0,9 % y como control de esterilidad CMH en solución salina 0,9 %, para concluir la microplaca fue incubada a 37 °C, durante el tiempo arrojado por la curva de crecimiento, en el cual se alcanza el máximo crecimiento microbiano, transcurrido el tiempo se verificó la densidad óptica en un lector de microplacas Multiskan EX, Thermo Scientific a 620 nm. Los resultados obtenidos fueron analizados aplicando un análisis de varianza (ANOVA) de una vía, seguido de un post test de Dunnet para comparaciones múltiples, aceptando diferencia estadística significativa a un valor de p<0,05.

RESULTADOS

Las pruebas confirmativas para Staphylococcus aplicadas a las cepas de estudio arrojaron resultados positivos, observándose al microscopio óptico células circulares con rasgos morfológicos característicos de los cocos,²⁶ las cuales se tiñeron de color violeta intenso, al retener el colorante cristal violeta en la gruesa capa de peptidocligano, característico de bacterias grampositivas. Respecto a la prueba de catalasa todas las cepas resultaron positivas, mostrando desprendimiento de burbujas al agregarles H₂O₂, debido a la liberación de oxigeno producto de la reacción de descomposición del peróxido, por acción de la enzima hidroxiperoxidasa, dentro de este grupo se encuentran bacterias como Staphylococcus aureus, Escherichia coli y Pseudomonas sp.²⁷ La prueba de la coagulasa mostró resultados positivos para todas las cepas obtenidas, evidenciado en la coagulación del plasma humano en los tubos de ensayo, debido a la conversión de fibrinógeno en fibrina por acción de la coagulasa bacteriana, esta prueba se emplea como criterio más usado para la diferenciar S. aureus de las especies coagulasa negativas como S. epidermidis y S. saprophyticus, por su gran exactitud y capacidad para detectar las fracciones unidas y libre de la coagulasa.²² Finalmente todas las cepas crecieron en el cultivo AMS, apreciándose el viraje del indicador rojo fenol a su color amarillo, resultado de la disminución del pH por la hidrolisis del manitol, este medio es selectivo y diferencial para S. aureus, debido a su capacidad de crecer en medios con alta concentración de cloruro de sodio 7,5 %.²⁸

Los datos en torno a la curva de crecimiento bacteriano mostraron como resultado la identificación de los intervalos de tiempos de crecimiento de las cepas de S. aereus, observando así fases bien diferenciadas, dentro de las cuales se encontró una de latencia corta de una hora, a partir de la cual las células iniciaban una segunda fase de crecimiento exponencial que duró alrededor de las diez horas, a partir de la décima hora de incubación los microorganismos entraron en fase estacionaria prolongándose por diez horas más, finalmente las últimas cuatro horas fueron de senescencia celular. Se escogió la hora 17 como tiempo clave para determinar la CMI de cada alternativa farmacéutica, ya que en éste punto se encuentran las células dentro de la fase estacionaria, alcanzando el máximo crecimiento bacteriano²⁴ (figura 3).

El método de microdilución en caldo permitió calcular las CMIs de las marcas de linezolid evaluadas frente a las cepas de Stapahylococcus aureus, basados en la comparación de los valores de absorbancias para cada pozo. Los valores obtenidos de absorbancias en los rangos de concentraciones de 64 a 2 µg/mL de linezolid para cada lote evaluado, no mostraron diferencias significativas al compararlas con las absorbancias del control negativo empleado (CMH-solución salina al 0,9 %), a su vez a concentraciones inferiores a 1 µg/mL de linezolid, se evidenciaba aumento en las respectivas absorbancias, denotando así crecimiento bacteriano, por lo cual se obtuvo una CMI dentro del rango de concentraciones de 1 a 2 µg/mL de linezolid para cada lote de antibiótico evaluado, de Zyvoxid y genéricos, frente a las tres cepas de S. aureus (ATCC, de muslo y cuello). Ambos lotes de linezolid, mostraron una respuesta similar frente a las tres cepas de S. aureus empleadas en el estudio, soportado por los valores en las CMIs (tabla), respecto a los resultados mostrados por el estándar de linezolid, se pudo observar que el comportamiento antimicrobiano se mantenía igual frente a cada cepa evaluada, arrojando CMIs de 2 ug/mL de linezolid, resultados que coinciden con los arrojados por las alternativas de Zyvoxid y genéricas.

Al comparar estadísticamente la actividad antibacteriana de los lotes de linezolid evaluados sobre cada cepa mediante análisis de varianza (ANOVA) con un valor de p<0,0001, no existió diferencia significativa entre las alternativas evaluadas frente a cada tipo de cepa, por lo que se obtiene el mismo efecto antibacteriano in vitro sobre S. aureus ATCC 29223 y cepas aisladas de pacientes con herida en cuello y muslo. Las pruebas para la determinación de concentraciones mínimas inhibitorias se realizaron por triplicado usando cada vez un lote diferente del antibiótico en estudio, mostrando un gran nivel de sensibilidad hacia el linezolid con ausencia de resistencia, soportado por el valor de referencia en la CMI≤4 µg/mL frente a cepas de S. aureus,³ lo que indica que el antibiótico puede inhibir el crecimiento bacteriano si se alcanza esta concentración en el sitio de la infección.

DISCUSIÓN

Las pruebas confirmativas empleadas para la identificación de las cepas de S aureus arrojaron resultados positivos característicos de la especie bacteriana evaluada, garantizando así el aislamiento correcto del organismo en cuestión.

Los resultados obtenidos en la curva de crecimiento microbiano en torno a los tiempos mostrados en la dinámica de crecimiento celular, presentaron similitud con lo reportado por Zhurbenko et al.,²⁹ lo que evidenció semejanzas en entre los tiempos en las diferentes fases de este proceso.

Aunque se evidencian pocos estudios de comparación de la actividad in vitro de marcas de linezolid, los resultados obtenidos en el presente estudio confirman lo publicado por Lo Cascio & Balzaj,³⁰al comparar la actividad in vitro de linezolid frente a otros antibacterianos como vancomicina y teicoplamina, obtuvieron valores de CMIs de 2 𝞵g/mL para linezolid. De igual manera contrastan con los obtenidos por Zhuo et al.,³¹ quienes reportan una CMI de 2 𝞵g/mL, y complementan los publicados con anterioridad por Fajardo et al.,³² y Mendes et al.,³³ al proponer valores de CMI entre 1-2 𝞵g/mL. Las CMIs obtenidas en el presente trabajo para los diferentes lotes de Zyvoxid y de linezolid genérico evaluados, junto con las semejanzas estadísticas en el comportamiento antimicrobiano de los lotes y el estándar, permiten proponerlos como alternativas terapéuticas intercambiables en el uso clínico, aunque este estudio muestre semejanzas en los resultados in vitro, se pueden proponer como equivalentes terapéuticos in vivo, que al ser medicamentos administrados por vía intravenosa, se asegura que la totalidad de la dosis administrada llegará a circulación sistemática, es decir alcanzan una biodisponibilidad del 100 %, y una vez en contacto con el microorganismo efectuará su actividad farmacológica. Adicionalmente, el linezolid administrado por vía oral reporta también una biodisponibilidad del 100 %, corroborando la tesis anterior, junto con el hecho de que para el producto genérico comercializado en Colombia no se reportan fallos terapéuticos por los organismos regulatorios ni en la literatura científica revisada.

Es necesario recomendar estudios adicionales de equivalencia terapéutica por grupos de patologías infecciosas, para evaluar esquemas de tratamiento y dosificación, que permitan establecer un perfil de intercambiabilidad terapéutica en diferentes situaciones clínicas.

CONFLICTO DE INTERESES

No declarado por los autores

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1. Pigrau C. 2003. Oxazolidinonas y glucopéptidos: Servicio de Enfermedades Infecciosas. Hospital Universitario Vall Hebron. Barcelona. España. P.º Vall Hebron; 2003: 119-129.

2. Lind C. Computational analysis of antibiotics binding to the ribosome. En: Examensarbete 30 hp. [Consultada el 3 de septiembre de 2014]. Disponible en: http://files.webb.uu.se/uploader/ibg.uu.se/73925_Lind_Christoffer_arbete.pdf

3. Rxlist (The Internet Drug Index). ZYVOX, Clinical Pharmacology;2014. [Consultada el 3 de septiembre de 2014]. Disponible en: http://www.rxlist.com/zyvox-drug/clinical-pharmacology.htm

4. Gómez M, Clavo A. Sección J. Quimioterapia Antiinfecciosa Y Antitumoral. En: Lorenzo, P. Velázquez. Farmacología Básica y Clínica. 18 edición. Buenos Aires: Panamericana;2009. p 791-796.

5. Pigrau C, Almirante B. Oxazolidonas,glucopeptidos y lipopeptidos ciclicos. Enfermedades Infecciosas y Microbiología Clínica. 2009;27(4):236-246.

6. Moellering R C. Linezolid: the first oxazolidinone antimicrobial. Ann Intern Med. 2003;138:135-42.

7. Jones RN, Frische TR, Sader HS, Ross JE. Zyvox annual apraisal of potency and spectrum program results for 2006: An activity and spectrum analysis of linezolid using clinical isolates from 16 countries. Diagn Microbiol Infect Dis. 2007;59:199-209.

8. Jones R N, Ross J E, Castanheira M, Mendes RE. United States resistance surveillance results for linezolid (LEADER Program for 2007). Diang Microbiol Infect Dis. 2008;62:416-2.

9. Mandell GL, Bennett JE, Dolin R. Enfermedades Infecciosas. Principios y práctiaca. 7a edición. Barcelona, España:Elsevier;2012.

11. Chiappini E, Conti C, De Martino M. Clinical efficacy and tolerability of linezolid in pediatric patients. Clinical Therapeutics. 2010;32(1):66-88.

12. Food and Drug Administration. FDA approves Zyvox, the first antimicrobial drug in a new class. Rockville, MD: National Press Office: April 19, Talk Paper T00-17 (2000).

13. Sánchez M, De La Torre M. Resistencia al linezolid: ¿una curiosidad de laboratorio o un problema clínico relevante?. Enfermedades Infecciosas y Microbiología Clínica. 2013;31(3):127-9.

14. Wong A, Reddy SP, Smyth DS, Aguero ME, Sakoulas G, Robinson DA. Polyphyletic emergence of linezolid-resistant staphylococci in the United States. Antimicrob Agents Chemother. 2010;54:742-8.

15. Lisboa T, Rello J. Neumonia Nosocomial Por Grampositivos. Enfermedades Infecciosas y Microbiología Clínica. 2008;26(2):53-60.

16. Stalker DJ, Jungbluth GL. Clinical pharmacokinetics of linezolid, a novel oxazolidinone antibacterial. Clin pharmacokinetics. 2003;42:1129-40.

17. Flamm RK, Mendes RE, Ross JE, Sader HS, Jones RN. An international activity and spectrum analysis of linezolid: ZAAPS Program results for 2011. Diagnostic Microbiology and Infectious Disease. 2013;76:206-213.

18.Draghi DC, Sheehan DJ, Hogan P, Sahm DF. In vitro activity of linezolid against key Gram-positive organisms isolated in the United States: results ofthe LEADER 2004 surveillance program. Antimicrob. Agents Chemother. 2005;49;5024-5032.

19. Mendes RE, Deshpande LM, Jones RN. Linezolid update: Stable in vitro activity following more than a decade of clinical use and summary of associated resistance mechanisms. Drug Resistance Updates. 2014;17:1-12.

20. Angell M. La verdad acerca de la Industria Farmacéutica, como nos engaña y qué hacer al respecto. Bogotá,Colombia: Editorial NORMA; 2006.

21. Laosa O, Guerra P, López JL, Mosquera B, Frías, J. Estudios de bioequivalencia: la necesidad de establecer la fiabilidad de los medicamentos genéricos. Revista Perú Med Exp Salud Pública. 2009;26(4):553-62.

22. Winn H, Allen J, Procop S. Diagnóstico Microbiológico. 6^a ed. Editorial Médica Panamericana S.A.: Argentina; 2008.

23. López-García JM, Cárdenas-Povedano M, Osuna-Molina A. Manual de laboratorio de microbiología para diagnóstico de infecciones genitales. 1era edicion. Caracas:Omnia Science Scholar; 2012.

24. CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute). 2009. Methods for dilution antimicrobial susceptibility tests for bacteria that grow aerobically. Approved Standard M7-A5. NCCLS, Wayne, Pa.

25. Gutiérrez L, Agudelo D. Control del crecimiento In Vitro sobre cepas Gram positivas y Gram negativas productoras de mastitis. Rev. Lasallista de investigación. 2009;6:67-74.

26. Sahm DF, Weissfeld AS. Diagnóstico Microbiológico. 12^aed. Editorial Médica Panamericana S.A: Argentina; 2009.

27. MacFaddin JF. Pruebas Bioquímicas para la Identificación de Bacterias de Importancia Clínica. 3^a ed. Editorial Médica Panamericana S.A.: Argentina; 2003.

28. Rodríguez E, Gamboa M, Hernández F, García, JD. Bacteriología General principios y prácticas de laboratorio. Editorial Universidad de Costa Rica: Costa Rica; 2006.

29. Zhurbenco R, Rodríguez C, Díaz M, Duran A, López O, Viera D. Caracterización de la peptona de soya para el cultivo de microorganismos. Revista Cubana de Medicina Tropical. 2006;58(2):109-18.

30. Lo Cascio G, Balzaj A. Performance of different comercial methods for determining minimun inhibitory concentrations of glycopeptides and linezolid againts blood isolates os Staphylococcus aureus. Journal of global antimicrobial resistance. 2013;1:163-169.

31. Zhuo C, Xu Y, Xiao S.N, Zhang G Y, Shong N S. Glycopeptide minimum inhibitory concentration creep among meticilin-resistant Staphylococcus aureus form 2006-2011 in china. International journal of antimicrobial agents. 2013;1:578-581.

32. Fajardo M, Hidalgo R, Rodríguez S, Gaona C, Sánchez R M, Hernández R, Martínez E, Cordero J L. Actividad de vancomicina, teicoplamina y linezolid en Staphylococcus coagulase negativos resistentes a meticilina en aislados de hemocultivos pediátricos. Revista Española de Quimioterapia. 2012;25(1):25-30.

33. Mendes RE, Deshpande LM, Jones RN. Linezolid update: Stable in vitro activity following more than a decade of clinical use and summary of associated resistance mechanisms. Drug Resistance Updates. 2014;17:1-12.

Recibido: 20 de junio 2016.
Aprobado: 20 de septiembre 2016.

Albeiro Manuel Marrugo Padilla . Facultad de Medicina Campus de la Salud, Barrio Zaragocilla, Universidad de Cartagena. Cartagena de Indias, República de Colombia. Teléfono: 6698176 - 6698178 Ext-172. Celular: 310-4404651.

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